Producción de anticuerpos monoclonales
Solicitud del servicio de producción de anticuerpos monoclonales
Los protocolos y el cuidado de los animales de experimentación se realiza según las especificaciones del Real Decreto 21/10/2005, sobre “Protección de los animales utilizados para experimentación y otros fines científicos”
El antígeno será aportado por el cliente y la cantidad del mismo, a convenir, dependerá de la naturaleza del inmunógeno. Se recomienda utilizar las siguientes cantidades:
- Proteínas recombinantes: 1.5-2.0 mg aprox.
- Péptidos sintéticos: 3.0 mg aprox.
Protocolo Estándar para la Generación de Anticuerpos Monoclonales
El protocolo de desarrollo de anticuerpos monoclonales se extenderá por un periodo de tiempo de entre 4 y 6 meses. El proyecto de desarrollo y producción de anticuerpos monoclonales, comprende los siguientes módulos:
- Reuniones preliminares para discutir la estrategia del proyecto
- Inmunización de 5 ratones BALB/c
- Hibridación
- Selección de clones positivos mediante ELISA, u otro inmunoensayo apropiado, seguida de dos clonaciones por dilución límite
- Entrega al cliente del sobrenadante (aprox. 1 ml) del cultivo de los clones positivos seleccionados para la valoración funcional de los anticuerpos monoclonales en su propio sistema
- Crecimiento/Expansión del hibridoma y criopreservación
- Determinación de la subclase IgG de los hibridomas y test de micoplasma
Se entregará al cliente:
- Suero pre-inmune de ratón aprox. 500 μl
- Tres crioviales y 15 ml de sobrenadante del cultivo de cada hibridoma seleccionado (máximo tres hibridomas)
- Información de los anticuerpos
Propiedad intelectual: los hibridomas resultantes son propiedad del cliente.
Servicios adicionales:
- Purificación por Proteína G
- Isotipado
- Conjugación a Biotina o Peroxidasa
- Almacenamiento en N2 líquido (1 año)
- Crecimiento de hibridomas
- Validación para su uso ELISA, Western Blot, IHC, IF y/o Citometría de flujo
